Molekulārā diagnoze atbilst kompleksam molekulārajām metodēm, kuru mērķis ir noteikt DNS izmaiņas, kas, piemēram, var liecināt par ģenētiskajām slimībām vai vēzi. Turklāt molekulārās metodes tiek plaši izmantotas, lai identificētu un apstiprinātu infekcijas slimības, jo tās veido ātrāku un precīzāku diagnostikas metodi.
Molekulārā diagnoze ir dārga, un tādēļ ārsti to ļoti bieži nepieprasa, tomēr tā sniedz precīzus rezultātus attiecībā uz pārmaiņām, kā tā var ietekmēt organisma darbību un pacienta reakciju uz slimību. ārstēšana.
Kas tas ir
Molekulāro diagnozi var veikt ar vairākiem mērķiem, no kuriem galvenie ir:
- Ar leikēmiju saistītas mutācijas, piemēram, BCR-ABL translokācijas identificēšana, kas raksturīga hroniskajai mieloīdo leikozi (HML);
- Piemēram, - saprot, kas ir trombofīlija un kā tiek veikta ārstēšana, - mutācijas, kas raksturīgas hematoloģiskām slimībām, piemēram, iedzimta hemochromatosis, polycythemia vera, būtiska trombocitēmija un trombofīlijas;
- Piemēram, molekulāras izmaiņas, kas liecina par vēža rašanos, piemēram, kolorektālo, plaušu, krūšu un smadzeņu vēzi;
- Papildus HPV vīrusa identificēšanai tiek diagnosticētas tādas infekcijas slimības kā hepatīts, uretrīts, toksoplazmoze, leihmanioze utt.
Molekulārā diagnoze, lai arī tā tiek uzskatīta par dārgu salīdzinājumā ar citām diagnostikas metodēm, ir precīzāka, jo tā spēj informēt izmaiņas, kas saistītas ar noteiktu slimību, un šīs pārmaiņas organismā, tādējādi veicinot personas ārstēšanu.
Papildus tam, ko izmanto dažādu slimību diagnostikai, molekulārās metodes tiek izmantotas arī, lai novērtētu atbildes reakciju uz ārstēšanu, īpaši cilvēkiem ar vēzi, kas ir viena no efektīvākajām metodēm slimības evolūcijas un recidīvu norādīšanai.
Kā tas tiek darīts
Molekulāro diagnozi var veikt ar jebkuru paraugu, un ārsts tiek lūgts sniegt informāciju par pacienta stāvokli, kas var būt urīns, siekalās vai lielāko daļu laika asinis. Pārbaudei nav nepieciešams ātri vai kāds cits sagatavošanās darbs.
Paraugs tiek savākts un nosūtīts laboratorijai kopā ar ārsta ieteikumu informēt eksāmenu vai pētījumu veidu, kas jāveic. Veiktā molekulārā metode ir atkarīga no pieprasītās pārbaudes un ietver virkni precīzu procedūru, kuru galvenais mērķis ir noteikt ārsta pieprasīto izmaiņu klātbūtni vai neesamību.
Parasti tiek izmantots tikai neliels parauga daudzums, bet pārējais tiek glabāts tā, lai vajadzības gadījumā testu atkārtotu.
Uzziniet, kādas ir galvenās molekulārās metodes
PCR
Polimerāzes ķēdes reakcijas īss apraksts ir molekulārā metode, kas sastāv no ģenētiskā materiāla fragmenta, vai nu DNS vai RNS, amplifikācijas ar mērķi noteikt mutācijas un tādējādi palīdzēt diagnosticēt slimības.
Šo paņēmienu iegūst no ģenētiskā materiāla ekstrakcijas un attīrīšanas, kas pēc tam tiek ievietots maisījumā, kurā viena no sastāvdaļām ir ierobežojošais enzīms, kas atkarībā no pieprasītā eksāmena atšķiras un kura uzdevums ir sagriezt materiālu fragmentos lai noteiktu iespējamās ģenētiskās pārmaiņas. Maisījums tiek ievietots termocikliskajā mašīnā, kas ir aparāts, kas iedarbojas caur temperatūras izmaiņām, ko profesionāls ir norādījis pārbaudē, tādējādi ļaujot paplašināt ģenētisko fragmentu. Attiecībā uz parasto PCR pēc amplifikācijas PCR produkts tiek pakļauts elektroforēzei, kas ir molekulārā metode, kuras pamatā ir fragmentu svars un lielums, ti, saskaņā ar šiem raksturlielumiem tiek ģenerēts joslu modelis, kura analīze tiek veikta pamatojoties uz pozitīvās kontroles joslu, tas ir, joslā, kas, kā zināms, atbilst ģenētiskajai izmaiņai.
Reālā laika PCR, ko sauc arī par qPCR, ir kvantitatīvās PCR veids, tas ir, papildus ģenētiskās izmaiņas identifikācijai tā spēj sniegt informāciju par gēnu ekspresiju, tas ir, cik daudz izmainītā gēna tiek ekspresēts organismā, un tādēļ to var izmantot diagnozes atbalstam un ārstēšanas uzraudzībai. Reāllaika PCR nav nepieciešama elektroforēze, viss ģenētiskā materiāla pastiprināšanas un analīzes process tiek veikts ar aparātu, un rezultātu interpretē apmācīts veselības speciālists.
Sequencing
Sequencing ir molekulārā metode, kas sastāv no DNS nukleotīdu secības noteikšanas. Sekvencēšana notiek no PCR tipa reakcijas, tomēr amplifikācijas maisījumā tiek pievienoti nukleotīdi, kas modificēti, pievienojot fluorohromus, tā kā materiāls tiek pastiprināts, modificētie nukleotīdi tiek iekļauti DNS un veido vairākus fragmentus, kas atbilst secības noteikšanas produktam.
Reakcijas produkts tiek ievietots aparātā, ko sauc par DNS sekvenciālu, kur, tā kā fragmentus satver aparāta lāzeris, fluorhromi tiek ierosināti, izstaro fluorescenci, ko aparāts norāda ar pīķu palīdzību, katra attiecīgā pīķa uz nukleotīdu. Reakcijas beigās iekārta informēs DNS sekvenci, tādējādi palīdzot ārstam diagnosticēt ģenētiskās slimības.
